Apports récents des techniques de quantification de la fibrose pour l’examen anatomopathologique en transplantation rénale

Recent approaches of quantification of interstitial fibrosis in renal transplantation

¹ Service de néphrologie, Assistance publique-Hôpitaux de Paris, hôpital Necker-Enfants malades, 149, rue de Sèvres, 75015 Paris, France, Université Paris Descartes, Paris, France
² Service de transplantation rénale, Assistance publique-Hôpitaux de Paris, Université Paris Descartes, hôpital Necker-Enfants malades, Paris, France
³ Institut Pasteur, unité d’analyse d’images quantitative, Paris, France
⁴ Université Lyon 1, Faculté de médecine Laennec, Hospices civils de Lyon, hôpital Édouard Herriot, Département de transplantation, Lyon, France
⁵ Laboratoire d’optique et biosciences, UMR7645 CNRS-U696, Inserm-École Polytechnique, Palaiseau, France

^* aude.servais@nck.aphp.fr

Résumé

La néphropathie chronique d’allogreffe constitue la cause principale de perte des greffons rénaux à long terme. Elle peut être détectée précocement par des biopsies de dépistage effectuées de manière systématique. La classification usuelle, semi-quantitative, souffre d’une mauvaise reproductibilité. Diverses méthodes morphométriques ont donc été développées pour quantifier la fibrose interstitielle qui caractérise cette néphropathie. Certaines utilisent la coloration spécifique par le rouge Sirius. L’analyse d’image couleur par segmentation permet une quantification automatique, rapide et robuste de la fibrose interstitielle. Elle utilise une segmentation couleur associée à une analyse de couleur, de localisation spatiale et de forme sur des biopsies colorées au trichrome de Masson. À l’avenir, l’étude des collagènes fibrillaires par la génération de second harmonique pourrait permettre une approche spécifique des composants de la fibrose.

Abstract

Chronic allograft injury can be diagnosed early at a pre-clinical stage by its histopathological changes. Interstitial fibrosis (IF), one of its main histopathological features, is currently assessed by semi- quantitative analysis according to the Banff classification. Subjective interpretation by the pathologist is the main limiting factor of such a method. Different morphometric approaches have been used to quantify IF. Point counting methods have been published but their use is very tedious. Thus, semi-automatic computerized measurements of IF in biopsy specimens immunostained for collagen III have been proposed. Most authors used Sirius Red-stained tissue examined under polarized or nonpolarized light. However, morphometric methods are time-consuming. Automatic color segmentation image analysis is a new, rapid, and robust method to quantify IF on renal biopsies stained by light green trichrome. It can be recommended as being reliable and reproducible for routine use. Methodology based on second harmonic generation microscopy allows specific quantitative imaging of interstitial fibrosis with high reproducibility and may bring complementary informations in the future. The prognostic value of quantitative image analysis might be increased by techniques addressing the dynamics of fibrosis matrix generation.