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Figure 3.

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Production de vecteurs AAV recombinants (AAVr) à partir d’AAV2. Le génome de l’AAV2 sauvage est un ADN simple brin composé de trois ORF, dont rep codant les protéines nécessaires à la réplication du virus, et cap codant les protéines de la capside virale. Le troisième ORF est un ORF alternatif dans cap, codant l’AAP, impliquée notamment dans l’encapsidation de l’AAV. Les ITR (inverted terminal repeat) sont des séquences répétées impliquées dans la réplication et l’encapsidation du virus. Dans le génome de l’AAVr, les ORF rep et cap sont remplacées par le gène thérapeutique choisi et un promoteur contrôlant son expression. La production en laboratoire de l’AAV recombinant est possible grâce à l’utilisation d’un plasmide auxiliaire contenant : (1) des gènes adénoviraux, dont les fonctions auxiliaires permettent de maximiser la production du virus, (2) l’ORF rep d’AAV2, et (3) l’ORF cap du sérotype choisi en fonction du tissu ou de l’organe à cibler. L’AAV issu de cette production est alors appelé AAV2/x, x correspondant au sérotype choisi ; néanmoins, par simplification, il est souvent noté AAVx. Cap : capside ; CGM : cellule gliale de Müller ; EPR : épithélium pigmentaire rétinien ; ITR : inverted terminal repeat ; rep : réplication ; SNC : système nerveux central ; PR : photorécepteur.

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