Différents types de migration macrophagique en 3D. A.  La migration 3D mésenchymateuse et amiboïde des macrophages humains est influencée par l’architecture des MEC. Les MEC indiquées sont polymérisées en couche épaisse (environ 1 mm) dans le compartiment supérieur des chambres de migration séparé par une membrane poreuse de 8 µm d’un compartiment inférieur dans lequel est placé un chimioattractant, le plus souvent du sérum. Les macrophages sont déposés à la surface des matrices. Des images en microscopie électronique à balayage montrent la structure des MEC et des images de microscopie confocale montrent des macrophages à la surface ou infiltrés dans la MEC, puis marqués avec de la phalloïdine-Texas Red dans les MEC sont montrées. On notera que la F-actine s’accumule à l’extrémité de protrusions cellulaires lors de la migration mésenchymateusee qui sont absentes lors de la migration amiboïde. B. Des macrophages d’un même donneur sont déposés sur des lamelles de verre recouvertes de collagène I (2D) et à la surface d’une matrice de collagène gel qu’ils ont infiltrée pour comparaison des podosomes 2D (flèches) et des podosomes 3D (têtes de flèche). La F-actine est marquée avec la phalloïdine, et la vinculine et la paxilline, deux protéines qui s’accumulent aux podosomes, sont révélées par immunofluorescence avec un anticorps secondaire couplé au FITC (fluorescéine ­isothyocyanate). Barre d’échelle : 10 µm.