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Figure 2

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Imagerie des cellules Caco-2/TC7 cultivées sur billes Cytodex 3 et infectées avec le virus influenza A/WSN/33. A. Des cellules Caco-2/TC7 cultivées sur billes Cytodex 3 ont été infectées par la souche A/WSN/33 du virus influenza (avec une multiplicité d’infection = 10 PFU/cellule). Au bout de 8 heures, elles ont été fixées, puis immuno-marquées avec des anticorps dirigés contre la nucléoprotéine NP (en rouge) et contre RAB11 (en cyan), avant d’être visualisées par microscopie confocale avec un objectif 93x dont la distance de travail était de 300 μm. Les images obtenues ont ensuite été déconvoluées à l’aide du logiciel de traitement d’images Huygens. Barre d’échelle = 10 μm, et 5 μm pour les images agrandies (zoom). L’intensité de fluorescence a été mesurée le long de la ligne indiquée en jaune, depuis la sphère jusqu’à l’extérieur de la cellule, et le résultat de cette mesure est représenté en B. C. Pourcentage des cellules non polarisées et polarisées présentant une accumulation de la nucléoprotéine NP à la membrane plasmique.** indique une différence statistiquement significative (p < 0,01). D. Images représentatives, en microscopie électronique à transmission, d’une coupe ultrafine de cellules Caco-2/TC7 polarisées sur billes Cytodex 3, puis infectées pendant 8 heures par la souche A/WSN/33 (avec une multiplicité d’infection = 10 PFU/cellule), ou non infectées. Barre d’échelle = 0,5 μm. Certaines structures membranaires du réticulum endoplasmique (RE) qui ont été mesurées (voir en E) sont surlignées en jaune à titre d’exemple. E. Quantification de la longueur des structures membranaires du RE dans des cellules non-infectées (NI) ou infectées (I). *** indique une différence statistiquement significative (p < 0,001). F. Classification des structures membranaires du RE mesurées en (E) selon leur ordre de longueur, dans les cellules polarisées non infectées (NI) ou infectées (I) par le virus.

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