Analyses morphologiques et fonctionnelles des organoïdes cérébraux. A. Évolution des organoïdes cérébraux en culture, du stade « corps embryoïde », à 5 jours de culture, jusqu’à 110 jours de culture. Les deux images de gauche montrent des observations d’organoïdes à la loupe (x 4,5), les deux autres à l’œil nu. Les organoïdes cérébraux ont été produits en utilisant le kit STEMdiff^TM Cerebral Organoid de STEMCELL^TM Technology. B. Visualisation des rosettes d’un organoïde cérébral après 25 jours de culture (J25) avec un marquage par un anticorps anti-PAX6 spécifiques des progéniteurs neuronaux. Les noyaux cellulaires sont marqués au DAPI (grossissement x10). C. marquage d’un organoïde à J25 montrant la colocalisation du marqueur de prolifération Ki67 (en vert) avec les progéniteurs neuronaux exprimant PAX6 (PAX6+) (en rouge), mais pas avec le marqueur neuronal TBR1 (en orange) (grossissement x 20). D. Immunomarquages d’un organoïde à J115 montrant la présence de cellules GFAP⁺ (en rouge), SATB2⁺ (en vert), CTIP2⁺ (en rouge) et TUJ1⁺ (en vert) (grossissement x 20). E. Capture d’écran de la « heat map », réalisée à l’aide du logiciel 3Brain, montrant l’enregistrement avec une puce de 4 096 microélectrodes, de l’activité électrique d’un organoïde cérébral (délimité par le contour violet). À droite, exemples de signaux d’activité neuronale enregistrés sur deux microélectrodes de la puce. PAX6 : paired box 6 ; TBR1 : T-box brain transcription factor 1 ; GFAP : glial fibrillary acidic protein ; SATB2 : special AT-rich sequence-binding protein 2 CTIP2 : coup-TFI interacting protein 2 ; TUJ1 : class III beta-tubulin.