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Med Sci (Paris)
Volume 33, Number 8-9, Août–Septembre 2017
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Page(s) | 698 - 700 | |
Section | Nouvelles | |
DOI | https://doi.org/10.1051/medsci/20173308004 | |
Published online | 18 September 2017 |
Activation par mécano-transduction de la gastrulation en réponse à des fluctuations de formes cellulaires
Mechanotransduction of gastrulation by cellular fluctuations
Mécanique et génétique du développement embryonnaire et tumoral, CNRS UMR168 - physico-chimie Curie, Institut Curie, 11, rue Pierre et Marie Curie, 75005 Paris, France
À l’origine de notre propre développement embryonnaire, nous partageons avec l’ensemble des organismes animaux cette étape cruciale du développement depuis plus de 800 millions d’années : la gastrulation. La gastrulation consiste en la formation de larges domaines de tissus qui internalisent l’embryon précoce souvent sous forme de tubes, et qui vont constituer les organes internes de l’animal adulte, tels que le tube digestif, ou le cœur, les muscles, ou les reins et les poumons, pour les organismes les plus complexes [1].
Dans l’embryon de drosophile, le premier de ces tubes, le mésoderme, donnera naissance à tous les organes internes de l’organisme adulte, excepté le tube digestif. Il se forme grâce à la stabilisation apicale (à la surface cellulaire extérieure de l’embryon) du moteur moléculaire myosine-II (Myo-II), ayant pour fonction de contracter la surface externe du tissu et ainsi d’induire la courbure du tissu vers l’intérieur pour former le tube mésodermal interne [2]. Le même processus est à l’origine de la formation de l’endoderme postérieur, c’est-à-dire du tube digestif postérieur, qui advient quelques minutes après la formation du mésoderme [3].
Dans le mésoderme, cette contraction se réalise en deux temps. Dans une première étape, les cellules se contractent de façon erratique et instable [4] (→) du fait de l’apparition de « spots de Myo-II » instables sur les apex cellulaires. Les apex des cellules du mésoderme subissent en effet des pulsations stochastiques de l’ordre de 20 % de leur taille, c’est-à-dire de 1 micron, leur existence dépendant de l’expression de la protéine Snail. Après un peu plus de 2 minutes de pulsations, les apex cellulaires se contractent de façon stable et coordonnée, résultat de la stabilisation des « spots de Myo-II » qui se mettent en place progressivement sur les apex cellulaires [5]. Cette stabilisation dépend de l’expression de la protéine secrétée Fog, connue pour activer une voie Rho-GTPase à l’origine de la stabilisation médio-apicale du moteur Myo-II et pour être nécessaire à la constriction apicale collective des cellules du mésoderme menant à son invagination [2].
(→) Voir la Nouvelle de B. Bénazéraf, m/s n° 1, janvier 2011, page 12
Nous avons montré que les contraintes mécaniques, développées par les fluctuations de formes cellulaires, activent la stabilisation apicale de la protéine Myo-II et déclenchent le processus actif d’invagination du mésoderme [6]. Pour cela, nous avons étudié un embryon de drosophile présentant une mutation affectant le facteur Snail, dont les cellules du mésoderme ne fluctuent plus, et qui ne présente plus d’activation de l’invagination du mésoderme [7]. Nous avons, dans un premier temps, observé qu’une simple indentation douce1 (de 3 à 5 microns) du mésoderme de ce mutant, à l’aide d’une pointe micrométrique micromanipulée, permettait de réintroduire des contraintes mécaniques dans un contexte mutant déficient en pulsations, permettant la stabilisation de la protéine Myo-II apicale et induisant l’invagination du mésoderme dépendant de Fog, deux processus inexistants dans le mutant de snail [6,8]. Si l’on observe l’invagination active de 50 microns de profondeur, plutôt que l’indentation, celle-ci se propage de façon autonome tout le long du mésoderme. En effet, les cellules invaginées déforment les cellules voisines et activent à leur tour mécaniquement leur contraction apicale, ce qui conduit in fine à leur invagination. On observe alors la propagation active d’ondes de contraction le long du mésoderme par un processus de mécano-transduction.
Dans un second temps, un travail collaboratif a été réalisé avec l’équipe de Nora Dempsey à l’institut Louis Néel de Grenoble, et celle de Christine Ménager du laboratoire Phénix à l’université Pierre et Marie Curie. Dans ce travail, nous avons reproduit quantitativement dans le mésoderme, par voie magnétique, les fluctuations de forme des apex cellulaires dont l’amplitude est de l’ordre de 1 micron seulement. Ceci a été réalisé en injectant dans les cellules du mésoderme des liposomes ultra-magnétiques et en approchant, à quelques microns de distance, un réseau de micro-aimants dont la taille individuelle, de 10 microns, est semblable à celle des cellules individuelles. Le champ magnétique local de ces micro-aimants ayant la particularité d’être modulable dans le temps, nous avons fait osciller les champs magnétiques micrométriques locaux, de telle sorte que les apex des cellules pulsent, exactement comme dans un embryon non muté (Figure 1-gauche). En réponse à cette stimulation mécanique, nous avons observé la stabilisation apicale du moteur Myo-II et le déclenchement de l’invagination du mésoderme (Figure 1-droite). Cette stimulation se fait par l’activation mécanique de réactions biochimiques, que nous avons identifiées comme étant la voie de signalisation Fog [6].
Figure 1. Mimer magnétiquement les pulsations cellulaires dans un embryon déficient rétablit l’invagination du mésoderme. Les pulsations magnétiquement induites (à gauche - en bas) dans le tissu mutant qui ne pulse pas (contrôle ; à gauche, en haut) provoquent (à droite) l’invagination active du mésoderme dans l’embryon invalidé par ARN interférence pour l’expression de Snail (mais aussi dans le mutant de snail, non montré) et qui est connu pour ne pas invaginer. Myo-II : myosine II ; Sna : snail ; Twi : twist. |
Nous avons en effet trouvé, dans le cadre de la stimulation mécanique par indentation, que le mécanisme à l’origine de ce processus est le blocage de l’endocytose de la protéine Fog [8]. Le modèle mécanistique que nous proposons est le suivant : lorsque l’apex d’une cellule se contracte transitoirement, durant la phase stochastique dépendante du facteur de transcription Snail, celle-ci dilate l’apex de la cellule voisine. Elle tend alors sa membrane plasmique et déplie les vésicules d’endocytose, empêchant ainsi la sécrétion de la protéine Fog. Ce blocage a pour effet l’inhibition de la dégradation du complexe Fog-récepteur, normalement internalisé dans les endosomes acides. Conséquence de cette inhibition de l’endocytose, la voie de signalisation est suractivée, aboutissant à la stabilisation apicale du moteur Myo-II. En accord avec ce modèle [9], on observe une accumulation membranaire apicale de la protéine Fog, après deux minutes de fluctuations dépendantes de Snail. Cette accumulation est inexistante chez un mutant du gène codant Snail qui ne fluctue plus. Elle est toutefois observée après stimulation mécanique du mésoderme de ces embryons mutants. Un blocage de l’endocytose immédiat, conditionné à un faible saut de température, dans un embryon doublement muté (pour la dynamine et snail), conduit également au rétablissement de la stabilisation apicale du moteur Myo-II et à l’invagination du mésoderme, comme on l’observe en réponse à la stimulation mécanique [8]. L’inhibition mécanique de l’endocytose comme processus de « mécano-transduction », a également été mise en évidence dans des cultures cellulaires [10, 11]. In vivo, un mécanisme de mécano-transduction dépendant de la protéine Fog est à l’origine de la stabilisation médio-apicale de la Myo-II qui déclenche l’invagination du mésoderme en réponse aux fluctuations de forme apicales. Toutefois, le rôle de l’inhibition mécanique de l’endocytose de la protéine Fog, démontré en réponse à l’indentation reste à caractériser pour ce qui concerne la réponse aux sollicitations mécaniques pulsées qui miment les fluctuations endogènes physiologiques.
Enfin, nous avons également montré, par voie magnétique, que les déformations mécaniques, provoquées par l’invagination du mésoderme sur les cellules de l’endoderme du pôle postérieur de l’embryon (futur tube gastrique postérieur de l’embryon), déclenchent à leur tour la stabilisation apicale de la Myo-II et initient la formation du tube gastrique selon un processus similaire dépendant de Fog (Figure 2) [6].
Figure 2. Signalisation mécanique lors de la gastrulation. A. Transition de phase de constriction stochastique/collective induite par mécano-transduction via Fog, à l’origine de l’invagination du mésoderme lors de la gastrulation. B. Cascade auto-inductive des invaginations méso-endodermales de la gastrulation, contrôlée par mécano-transduction dépendant de la protéine Fog. |
Le déclenchement de la gastrulation initie les tout premiers mouvements morphogénétiques actifs de l’embryogenèse chez tous les organismes animaux depuis leur origine. De tout le règne animal, c’est dans l’embryon de drosophile que sa régulation biochimique est la mieux caractérisée. Dans cet embryon, nous avons décrit un processus actif de déclenchement mécaniquement induit de la stabilisation apicale de la myosine-II générant l’invagination de l’endoderme et du mésoderme.
Liens d’intérêt
Les auteurs déclarent n’avoir aucun lien d’intérêt concernant les données publiées dans cet article.
Références
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Liste des figures
Figure 1. Mimer magnétiquement les pulsations cellulaires dans un embryon déficient rétablit l’invagination du mésoderme. Les pulsations magnétiquement induites (à gauche - en bas) dans le tissu mutant qui ne pulse pas (contrôle ; à gauche, en haut) provoquent (à droite) l’invagination active du mésoderme dans l’embryon invalidé par ARN interférence pour l’expression de Snail (mais aussi dans le mutant de snail, non montré) et qui est connu pour ne pas invaginer. Myo-II : myosine II ; Sna : snail ; Twi : twist. |
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Figure 2. Signalisation mécanique lors de la gastrulation. A. Transition de phase de constriction stochastique/collective induite par mécano-transduction via Fog, à l’origine de l’invagination du mésoderme lors de la gastrulation. B. Cascade auto-inductive des invaginations méso-endodermales de la gastrulation, contrôlée par mécano-transduction dépendant de la protéine Fog. |
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