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Figure 2.

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Comparaison des procédures de la PCR classique et de la PCR digitale. Exemple de l’analyse d’un échantillon contenant 0,1 % de séquences mutées. L’expérience de PCR est réalisée avec un mélange de sondes spécifiques de la séquence mutée (en vert) et de la séquence non mutée (en rouge). La qPCR conventionnelle (gauche) amplifiera toutes les molécules d’ADN cibles présentes. Le signal obtenu représentera donc un signal moyen englobant l’ensemble des signaux correspondant aux différents ADN présents, et le signal provenant des séquences sous-représentées pourra être masqué par celui des séquences abondantes. La PCR digitale (droite) permet d’amplifier chaque ADN cible dans un compartiment indépendant. L’analyse de la fluorescence de ces compartiments indépendants permet de détecter ceux qui contiennent un ADN muté. La procédure est quantitative et sa sensibilité dépend du nombre de compartiments analysés (modifiée d’après Taly et al. [23].)

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