Technique PRINS triple-couleurs. A. Schéma de la technique PRINS triple-couleurs développée par Yan et al. [21]. Après trois réactions PRINS consécutives, les cibles des chromosomes 7, 8 et 18 sont identifiées respectivement par les couleurs jaune, rouge et vert. Les flèches en pointillés situées sous l’ADN chromosomique indiquent les sites d’extension sur chaque brin du début à la fin de chaque réaction PRINS. La méthode illustrée ici correspond au marquage séquentiel (trois réactions successives) utilisant la biotine, la digoxigénine et la biotine. La détection est réalisée avec l’avidine-fluorescéine et l’anti-digoxigénine-rhodamine qui se lient respectivement à la biotine et à la digoxigénine. Les meilleurs résultats, pour la création de la couleur jaune, sont obtenus avec un rapport 2 : 1 de fluorescence verte par rapport à la fluorescence rouge. Cela est dû aux intensités d’excitation et d’émission supérieures du fluorochrome rouge par rapport à celles du fluorochrome vert. B. Détection simultanée de trois chromosomes par réaction PRINS triple-couleurs sur une métaphase et un noyau interphasique. Les deux signaux jaunes correspondent aux centromères des chromosomes 7 (première cible) et sont facilement reconnaissables. Les deux signaux rouges correspondent aux centromères des chromosomes 8 (deuxième cible) et les deux signaux purement verts représentent les centromères des chromosomes 18 (troisième cible).