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Figure 1.

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Méthode de visualisation du pool endosomal de BACE1. Les cellules exprimant BACE1 portant l’étiquette fluorescente YFP à l’extrémité carboxy-terminale (BACE1-YFP) sont incubées plusieurs heures en présence d’α-bungarotoxine fluorescente (BTX), qui se lie à l’extrémité amino-terminale de BACE1 lorsqu’elle atteint la surface de la cellule (1). L’endocytose étant continue lorsque les cellules sont maintenues à 37 °C, le pool de BACE1 dans les endosomes comporte l’étiquette BTX. L’excédent de BTX dans le milieu est ensuite éliminé par lavage. Le pool de BACE1 présent dans les endosomes émet une fluorescence rouge et verte, tandis que le pool de BACE1 dans les vésicules de sécrétion fluoresce seulement en vert.

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