Principe du ciblage de gènes à l’aide de nucléases à doigts de zinc. Haut : Les nucléases à doigts de zinc sont des protéines artificielles comportant un domaine de liaison à l’ADN et un domaine de clivage (ciseaux). La fixation à l’ADN est assurée par plusieurs motifs en doigt de zinc (1, 1’ à 4, 4’), liant chacun trois nucléotides. Les combinatoires de doigts de zincs sont choisies de telle sorte que les deux nucléases lient des régions d’ADN rapprochées permettant ainsi la dimérisation et l’activation du domaine de clivage. Une coupure double brin de l’ADN peut ainsi être induite localement dans une région prédéfinie du génome. Bas : La cassure double brin de l’ADN peut alors être réparée selon deux voies. La non homologous end joining (NHEJ), mécanisme sujet à l’erreur, s’accompagne fréquemment de délétions et d’insertions pouvant provoquer des mutations perte de fonction. La cassure peut également être réparée par recombinaison homologue (RH) en prenant comme modèle une matrice de réparation présentant des séquences d’homologies de part et d’autre de la cassure. Les modifications présentes sur cette matrice sont alors recopiées à l’identique sur le chromosome.