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Numéro
Med Sci (Paris)
Volume 22, Numéro 8-9, Août–Septembre 2006
Page(s) 685 - 688
Section Nouvelles
DOI https://doi.org/10.1051/medsci/20062289685
Publié en ligne 15 août 2006

Depuis C. elegans jusqu’aux vertébrés supérieurs, la voie de signalisation Notch contrôle la compétence de multiples types cellulaires à se différencier. L’activation du récepteur transmembranaire Notch (un gène chez la drosophile, 4 chez les mammifères) est déclenchée par son interaction avec un ligand transmembranaire de la famille DSL (Delta ou Serrate chez la drosophile, Delta 1, 3, 4, ou Jagged 1, 2 chez les mammifères) présenté par une cellule voisine. Le récepteur subit alors deux coupures protéolytiques successives, dans son domaine extracellulaire par une protéase de la famille ADAM (a disintegrin and metalloprotease), puis au sein du domaine transmembranaire par un complexe multiprotéique, la γ-sécrétase (Figure 1). Le domaine intracellulaire du récepteur est ainsi libéré dans le cytoplasme et migre dans le noyau, où il interagit avec la protéine CSL (CBF1, aussi appelé RBP-Jk chez les vertébrés, Su(H) chez la drosophile, et Lag-1 chez C. elegans) pour reconstituer un activateur transcriptionnel. Les ligands comme les récepteurs sont soumis à des processus comparables de clivages protéolytiques successifs et d’endocytose, sans que, concernant les ligands, leurs rôles soient encore bien compris. L’importance de l’endocytose des ligands et du récepteur Notch pour la signalisation a été initialement décrite chez la drosophile [1] grâce à l’utilisation de mutants pour la dynamine, et fait l’objet de nombreux travaux récents.

thumbnail Figure 1.

Schéma simplifié de la voie de signalisation Notch. Pendant la maturation de la protéine, Notch subit un premier clivage par la furine (S1). Après l’interaction avec son ligand, ici Delta, Notch subit un second clivage (S2) par une métalloprotéase TACE. Le domaine extracellulaire (NECD) du récepteur Notch est relargué, et le fragment tronqué du domaine extracellulaire restant devient le substrat du complexe γ-sécrétase qui libère le fragment intracellulaire du récepteur (NICD). Celui-ci migre dans le noyau où il forme un complexe activateur de la transcription avec CSL et MAM (mastermind) qui active les gènes cible de la famille hes/hey (hairy enhancer of split) (d’après [13]).

Tableau I.

Conservation et rôles des facteurs impliqués dans le trafic de Notch et de ses ligands.

Endocytose du récepteur Notch

L’endocytose du récepteur Notch est nécessaire pour le maintien d’une quantité fixe de récepteurs activables à la membrane, en ciblant et accompagnant les molécules surnuméraires ou défectueuses vers la dégradation, mais elle intervient aussi après activation du récepteur pour le diriger vers le compartiment où peut agir la γ-sécrétase. Nous avons montré que le récepteur Notch, après activation, doit être internalisé et mono-ubiquitinylé pour être clivé par la γ-sécrétase [2]. Chez la drosophile, Sanpodo, une molécule à 4 domaines transmembranaires, joue probablement un rôle positif dans l’activation de Notch en régulant son internalisation de façon antagoniste à Numb [3].

Lorsqu’il n’est pas activé, le récepteur Notch est internalisé et transporté dans des vésicules d’endocytose jusqu’aux lysosomes. Une des premières étapes de ce voyage est l’ubiquitinylation de Notch. Ce signal encore mal caractérisé lui permet probablement d’être trié par interaction avec Hrs/Vps27, puis dirigé vers les vésicules contenant les complexes ESCRT-I (endosomal sorting complex required for transport) puis ESCRT-II et ESCRT-III. Les protéines sont alors invaginées dans des petites vésicules au sein des MVB (corps multivésiculaires) et finalement dégradées après fusion des MVB avec les lysosomes. Chez la drosophile, des mutants pour plusieurs des molécules impliquées dans ces trafics bloquent effectivement la dégradation du récepteur, ce qui explique qu’ils provoquent une augmentation de l’activité Notch. C’est le cas pour Vps25, Vps22, et Vps32 [4, 5]. En revanche, si les voies d’endocytose sont bloquées plus en amont, par diminution de Hrs, Avl (homologue des syntaxines 7 ou 12, localisé dans les endosomes précoces) ou Rab5, Notch s’accumule à la surface cellulaire mais son activité globale n’augmente pas [6]. Ces résultats sont compatibles avec l’idée selon laquelle le récepteur, qu’il soit activé par liaison du ligand ou pas, subit le processus d’endocytose par une voie dépendant de Rab5 et Avl, et qu’une étape de tri a alors lieu. Selon l’état d’ubiquitinylation du récepteur ou son association avec certaines molécules, il pourrait alors poursuivre sa route vers l’activation ou la dégradation. L’étude des ubiquitinylations subies par le récepteur, et des E3 ubiquitine ligases spécifiques de chacune d’entre elles permettra d’élucider ces phénomènes. L’ubiquitinylation par Nedd4 ou Itch/Su(Dx) et cbl pourrait permettre au récepteur d’être dégradé, tandis que son unique mono-ubiquitinylation lui serait nécessaire pour être reconnu par le complexe γ-sécrétase et donc activer ses gènes cibles.

Endocytose des ligands

Des études génétiques menées chez la drosophile et le poisson zèbre ont montré qu’un certain nombre de gènes régulaient l’activité des ligands [7]. Ils agissent sur l’endocytose des ligands et sont indispensables à l’activation du récepteur porté par une cellule voisine. Neuralized et Mind bomb, deux E3 ubiquitine ligases, sont conservées chez les mammifères, et ont des fonctions partiellement redondantes qui permettent le recrutement des ligands et le transfert de l’ubiquitine sur ces derniers. De telles modifications sont nécessaires pour l’internalisation des ligands : en l’absence de ces enzymes, les ligands s’accumulent à la surface de la cellule. Cette endocytose de Delta a lieu en l’absence de toute interaction entre le récepteur et le ligand [8]. Le trafic du ligand Delta et donc son activité de signalisation peuvent êtres abolis par un antagoniste de Neuralized, appartenant à la famille des protéines Bearded [9, 10]. Lqf, homologue de l’epsine de mammifère, joue un rôle dans le recrutement d’AP-2 et la formation des puits recouverts de clathrine. Elle ciblerait, via son domaine d’interaction avec l’ubiquitine, les ligands mono-ubiquitinylés vers certains compartiments d’endocytose. La quantité disponible de Lqf est contrôlée par Fat Facets (Faf), qui empêche la dégradation de Lqf en catalysant sa désubiquitinylation [11]. Chez la drosophile, Rab11 et son effecteur Sec15, ce dernier initialement identifié comme composant des vésicules d’exocytose, sont également requis pour le recyclage et l’activité du ligand Delta [12].

Plusieurs modèles ont été proposés pour expliquer comment l’endocytose des ligands et leur trafic dans la cellule émettrice du signal étaient nécessaires à l’activation du récepteur dans la cellule voisine [13] (Figure 2).

thumbnail Figure 2.

Différents modèles proposés pour le rôle de l’endocytose de Delta dans le fonctionnement de la signalisation Notch. A. L’endocytose de Delta facilite le second clivage (S2) du récepteur Notch. B-D. L’endocytose de Delta et son recyclage résulte en une présentation des molécules Delta plus efficace. B. Le recyclage de Delta entraîne son regroupement avec d’autres molécules ainsi qu’avec des cofacteurs et sa localisation dans un microdomaine, ou sa modification (étoile rouge) dans le domaine extracellulaire facilitant son interaction avec le récepteur Notch. C. Après son endocytose, les ligands Delta sont internalisés dans des corps mutivésiculaires (MVB), et via des exosomes, relarguent plusieurs molécules Delta groupées (d’après [13]).

  1. La trans-endocytose de la région extracellulaire du récepteur associée au ligand serait une étape nécessaire au clivage activateur (S2) du récepteur (Figure 2A).

  2. Lors de l’endocytose et du recyclage vers la membrane, les ligands subiraient des modifications, ou s’associeraient à des cofacteurs, les rendant plus affins pour le récepteur (Figure 2B).

  3. Le recyclage ciblerait les ligands vers des microdomaines membranaires où, en association avec des cofacteurs, ils pourraient se regrouper et établir des liaisons plus fortes avec les récepteurs eux-mêmes agglutinés sur la cellule voisine (Figure 2B).

  4. Les ligands internalisés et regroupés dans les MVB seraient libérés dans le milieu extracellulaire sous la forme d’exosomes (Figure 2C).

Les modèles proposés expliquent comment l’endocytose des ligands est nécessaire à l’activation du récepteur en trans. Les ligands du récepteur Notch ayant une ou des fonction(s), dans la cellule où ils sont exprimés, autre(s) que celle d’activer le récepteur, il reste à étudier le lien entre les processus d’endocytose et ces fonctions (adhérence, mobilité, signalisation…). La recherche de partenaires du ligand Delta a abouti à la caractérisation de protéines appartenant à la famille des protéines à domaines PDZ [14, 15] dont on ne sait pas encore si elles jouent un rôle dans le trafic de Delta.

Références

  1. Seugnet L, Simpson P, Haenlin M. Requirement for dynamin during Notch signaling in Drosophila neurogenesis. Dev Biol 1997; 192 : 585–98. (Dans le texte)
  2. Gupta-Rossi N, Six E, LeBail O, et al. Monoubiquitination and endocytosis direct g-secretase cleavage of activated Notch receptor. J Cell Biol 2004; 166 : 73–83. (Dans le texte)
  3. O’Connor-Giles KM, Skeath JB. Numb inhibits membrane localization of Sanpodo, a four-pass transmembrane protein, to promote asymmetric divisions in Drosophila. Dev Cell 2003; 5 : 231–43. (Dans le texte)
  4. Thompson BJ, Mathieu J, Sung HH, et al. Tumor suppressor properties of the ESCRT-II complex component Vps25 in Drosophila. Dev Cell 2005; 9 : 711–20. (Dans le texte)
  5. Vaccari T, Bilder D. The Drosophila tumor suppressor vps25 prevents nonautonomous overproliferation by regulating Notch trafficking. Dev Cell 2005; 9 : 687–98. (Dans le texte)
  6. Lu H, Bilder D. Endocytic control of epithelial polarity and proliferation in Drosophila. Nat Cell Biol 2005; 7 : 1232–9. (Dans le texte)
  7. Le Borgne R. Regulation of Notch signalling by endocytosis and endosomal sorting. Curr Op Cell Biol 2006; 18 : 213–22. (Dans le texte)
  8. Morel V, Le Borgne R, Schweisguth F. Snail is required for Delta endocytosis and Notch-dependent activation of single-minded expression. Development 2003; 213 : 65–72. (Dans le texte)
  9. Bardin AJ, Schweisguth F. Bearded family members inhibit neuralized-mediated endocytosis and signaling activity of Delta in Drosophila. Dev Cell 2006; 10 : 245–55. (Dans le texte)
  10. De Renzis S, Yu J, Zinzen R, et al. Dorsal-ventral pattern of Delta trafficking is established by a Snail-Tom-neuralized pathway. Dev Cell 2006; 10 : 257–64. (Dans le texte)
  11. Overstreet E, Fitch E, Fischer JA. Fat facets and liquid facets promote Delta endocytosis and Delta signaling in the signaling cells. Development 2004; 131 : 5355–66. (Dans le texte)
  12. Emery G, Hutterer A, Berdnik D, et al. Asymmetric Rab11 endosomes regulate Delta recycling and specify cell fate in the Drosophila nervous system. Cell 2005; 122 : 763–73. (Dans le texte)
  13. Chitnis AB. Why is Delta endocytosis required for effective activation of Notch ? Dev Dyn 2006; 235 : 886–94. (Dans le texte)
  14. Six EM, Ndiaye D, Sauer G, et al. The Notch ligand Delta1 recruits Dlg1 at cell-cell contacts and regulates cell migration. J Biol Chem 2004; 279 : 55818–26. (Dans le texte)
  15. Wright GJ, Leslie JD, Ariza-McNaughton L, et al. Delta proteins and MAGI proteins : an interaction of Notch ligands with intracellular scaffolding molecules and its significance for zebrafish development. Development 2004; 131 : 5659–69. (Dans le texte)

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Liste des tableaux

Tableau I.

Conservation et rôles des facteurs impliqués dans le trafic de Notch et de ses ligands.

Liste des figures

thumbnail Figure 1.

Schéma simplifié de la voie de signalisation Notch. Pendant la maturation de la protéine, Notch subit un premier clivage par la furine (S1). Après l’interaction avec son ligand, ici Delta, Notch subit un second clivage (S2) par une métalloprotéase TACE. Le domaine extracellulaire (NECD) du récepteur Notch est relargué, et le fragment tronqué du domaine extracellulaire restant devient le substrat du complexe γ-sécrétase qui libère le fragment intracellulaire du récepteur (NICD). Celui-ci migre dans le noyau où il forme un complexe activateur de la transcription avec CSL et MAM (mastermind) qui active les gènes cible de la famille hes/hey (hairy enhancer of split) (d’après [13]).

Dans le texte
thumbnail Figure 2.

Différents modèles proposés pour le rôle de l’endocytose de Delta dans le fonctionnement de la signalisation Notch. A. L’endocytose de Delta facilite le second clivage (S2) du récepteur Notch. B-D. L’endocytose de Delta et son recyclage résulte en une présentation des molécules Delta plus efficace. B. Le recyclage de Delta entraîne son regroupement avec d’autres molécules ainsi qu’avec des cofacteurs et sa localisation dans un microdomaine, ou sa modification (étoile rouge) dans le domaine extracellulaire facilitant son interaction avec le récepteur Notch. C. Après son endocytose, les ligands Delta sont internalisés dans des corps mutivésiculaires (MVB), et via des exosomes, relarguent plusieurs molécules Delta groupées (d’après [13]).

Dans le texte

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