Figure 3.

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Nanochirurgie du cytosquelette en interphase. Dans les cellules de mammifères (A. cellule Ptk-2 transfectée de façon stable avec une construction α-tubuline-YFP), les microtubules peuvent êtres sectionnés par un laser UV à impulsions (470 ps). L’irradiation à basse énergie (minimum 50 nJ) le long d’une ligne (pointillés bleus) forme un front de catastrophes artificielles, créant ainsi de nouvelles pointes plus (+) et moins (−) des microtubules présents dans le volume de dissection. Chaque microtubule réagit de manière différente. La dépolymérisation (flèches rouges en B, C, D, E) de la pointe (+) est le phénomène le plus fréquent après la catastrophe et le sauvetage alors que la pointe (−) reste relativement stable. La dépolymérisation, la recroissance ou l’état de pause après une catastrophe au laser sont illustrés en E, F et G à l’aide de kymographes (graphe traçant l’intensité lumineuse le long de l’axe du microtubule en fonction du temps). Les flèches vertes en G suivent la progression de la pointe d’un microtubule au travers des phases de dépolymérisation, sauvetage et recroissance en correspondance avec la séquence d’images B, C, D. L’instabilité dynamique de simples filaments peut être induite et mesurée n’importe où dans le cytoplasme (adapté d’après [4]). Échelle : (D) 5 µm, (E) 5 µm horizontal, 30 secondes vertical.
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