Figure 2.

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RAB6 et la dynéine sont essentielles au transport apical polarisé du complexe Crumbs. A. Coupes coronales de cerveau d’embryons de souris témoins (i.e. de génotype sauvage) où les protéines Crumbs 3 (CRB3) et PALS1 sont immunomarquées, montrant la localisation apicale du complexe moléculaire Crumbs. Les noyaux sont colorés au DAPI (bleu). Barre d’échelle : 25 µm. B. Le système RUSH permet de retenir une protéine rapporteuse (ici CRB3-GFP) dans le réticulum endoplasmique (RE) grâce à l’interaction entre un peptide d’attachement à la streptavidine (streptavidin-binding peptide, SBP) et la streptavidine (St) fusionnée à une protéine résidente du RE (i.e., contenant le motif KDEL à l’extrémité C-terminale de sa séquence peptidique). L’ajout de biotine en excès dans le milieu de culture induit un relargage synchrone de la protéine rapporteuse retenue dans le RE et permet de suivre son transport intracellulaire par microscopie photonique à fluorescence. C..L’expression de la construction CRB3-GFP-RUSH dans des cellules de la glie radiaire apicales permet de montrer que l’inhibition de l’activité de la dynéine par le peptide CC1 p150Glued bloque l’acheminement de CRB3 vers la membrane plasmique apicale. Barre d’échelle : 5 µm. D. Le complexe RAB6/dynéine contrôle le transport polarisé post-golgien de la protéine Crumbs, impliquée dans la polarité apico-basale cellulaire, vers la membrane apicale des cellules de la glie radiaire. Cette voie de transport le long des microtubules est essentielle à l’établissement et au maintien des jonctions d’adhérence intercellulaire apicales.
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