Le système de sécrétion de type VII (ESX-4) impliqué dans la virulence de Mycobacterium abscessus. A. Crible de survie intracellulaire chez l’amibe de 6 000 mutants de la banque de M. abscessus lors d’une co-culture en présence de l’amibe Acanthamoeba castellanii. La survie intracellulaire des mutants est évaluée par comptage des CFU (colony -forming unit) ; 136 mutants défectueux pour leur croissance intracellulaire (soit 2,3 % de la banque) ont été identifiés. Un second crible de survie intracellulaire, chez l’amibe et en présence de macrophages, a ensuite permis de confirmer l’atténuation de 47 mutants dont 12 portant des mutations localisées (y compris des doublons) dans le locus esx-4 du système de sécrétion de type VII (SST7). Parmi ces 12 mutants, 9 présentent une insertion dans les gènes eccC₄ (esx-conserved component : 2 mutants-souches 37F10 et 24H3), eccD₄ (2 mutants-5A1 ; 7A1), MycP₄ (mycosin-1 protease : 18D4), eccB₄ (5 mutants-32C9 ; 14B9 ; 19D4 ; 32C7 ; 25E4), eccE₄ (2 mutants 14E9 ; 15G8) et du locus esx-4. Trois mutants supplémentaires présentent des mutations localisées dans le gène espI (esx-1 secretion-associated protein : 43A3 ; 13F7 ; 2D10) impliqués dans la régulation d’ESX-1 chez M. tuberculosis, et 1 mutant supplémentaire dans le gène sigM (sigma factor gene : 13C3). B. L’analyse du génome de M. abscessus indique la présence de 2 systèmes de sécrétion, ESX-3 et ESX-4. Un mutant obtenu par double recombinaison homologue du gène eccB₄ a permis de confirmer, par des expériences de co-cultures entre ce mutant (Mabs-ΔEccB) et des macrophages humains, que ce gène, et par conséquent le système de sécrétion ESX-4, sont impliqués dans la survie intracellulaire, le blocage de l’acidification phagosomale, et favorisent les contacts entre la bactérie et le cytosol. Le sécrétome de ce mutant versus celui de la souche parentale est actuellement en cours d’étude afin d’identifier les substrats de cette machinerie de sécrétion.