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Tableau I.

Exemples représentatifs de stratégies de surexpression des RCPG, de systèmes cellulaires et d’approches de purification. IMAC : immobilized metal affinity chromatography ; MBP : maltose-binding protein ; Trx : thiorédoxine ; 6×His : peptide de 6 résidus histidine ; GFP : green fluorescent protein ; T4L : T4 lysozyme ; IEX : ion exchange chromatography ; épitope flag : peptide ADDDDKYD ; épitope 1D4 : peptide TETSQVAPA ; épitope T7 : peptide MASMTGGQQMG.

RCPG/ligand Système cellulaire Stratégie de surexpression Purification Réf.
NTS1/neurotensine Procaryote Membranaire 1) IMAC [1]
Bactérie Fusion MBP–Trx, épitope 6×His 2) Chromatographie d’affinité
Escherichia coli (ligand fixé = neurotensine)
BLT2/leucotriène B4 Procaryote Corps d’inclusion 1) IMAC [2]
Bactérie Fusion intégrine, épitope 6×His 2) Chromatographie d’affinité
Escherichia coli (ligand fixé = antagoniste 5bα)
µ-opioïde/ enképhalines Eucaryote unicellulaire Membranaire IMAC [5]
Levure Fusion GFP (optionnel),
Pichia pastoris épitope 6×His
H1/ histamine Eucaryote unicellulaire Membranaire IMAC [6]
Levure Fusion T4L et GFP,
Pichia pastoris épitope 6×His
β2AR/ adrénaline
noradrénaline Eucaryote Membranaire, épitope Flag 1) Anticorps [7]
Insecte (T4L optionnel) 2) Chromatographie d’affinité
Spodoptera frugiperda(cellules Sf9) (ligand fixé = antagoniste alprénolol)
CXCR4/
chémokines Eucaryote Membranaire IMAC [10]
Insecte Fusion T4L,
Spodoptera frugiperda (cellules Sf9) épitope 6×His
Rhodopsine/ rétinal Eucaryote Membranaire, 1) Anticorps [12]
Mammifère, épitope 1D4 2) IEX
singe vert africain
(cellules COS-1)
M1/ acétylcholine Eucaryote Membranaire, Pas décrite [13]
Mammifère, hamster épitopes Flag et biotine
(cellules BHK-21)
A1/ adénosine Eucaryote Membranaire, Anticorps [16]
Mammifère, souris
(rétine) épitope 1D4
ETA, ETB/ endothéline Acellulaire, in vitro Micelles détergents ou précipité, IMAC [17]
Extraits bactériens ou extraits de réticulocytes épitope T7, épitope 6×His

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