Tableau I.
Exemples représentatifs de stratégies de surexpression des RCPG, de systèmes cellulaires et d’approches de purification. IMAC : immobilized metal affinity chromatography ; MBP : maltose-binding protein ; Trx : thiorédoxine ; 6×His : peptide de 6 résidus histidine ; GFP : green fluorescent protein ; T4L : T4 lysozyme ; IEX : ion exchange chromatography ; épitope flag : peptide ADDDDKYD ; épitope 1D4 : peptide TETSQVAPA ; épitope T7 : peptide MASMTGGQQMG.
| RCPG/ligand | Système cellulaire | Stratégie de surexpression | Purification | Réf. |
|---|---|---|---|---|
| NTS1/neurotensine | Procaryote | Membranaire | 1) IMAC | [1] |
| Bactérie | Fusion MBP–Trx, épitope 6×His | 2) Chromatographie d’affinité | ||
| Escherichia coli | (ligand fixé = neurotensine) | |||
| BLT2/leucotriène B4 | Procaryote | Corps d’inclusion | 1) IMAC | [2] |
| Bactérie | Fusion intégrine, épitope 6×His | 2) Chromatographie d’affinité | ||
| Escherichia coli | (ligand fixé = antagoniste 5bα) | |||
| µ-opioïde/ enképhalines | Eucaryote unicellulaire | Membranaire | IMAC | [5] |
| Levure | Fusion GFP (optionnel), | |||
| Pichia pastoris | épitope 6×His | |||
| H1/ histamine | Eucaryote unicellulaire | Membranaire | IMAC | [6] |
| Levure | Fusion T4L et GFP, | |||
| Pichia pastoris | épitope 6×His | |||
| β2AR/ adrénaline noradrénaline | Eucaryote | Membranaire, épitope Flag | 1) Anticorps | [7] |
| Insecte | (T4L optionnel) | 2) Chromatographie d’affinité | ||
| Spodoptera frugiperda(cellules Sf9) | (ligand fixé = antagoniste alprénolol) | |||
| CXCR4/ chémokines | Eucaryote | Membranaire | IMAC | [10] |
| Insecte | Fusion T4L, | |||
| Spodoptera frugiperda (cellules Sf9) | épitope 6×His | |||
| Rhodopsine/ rétinal | Eucaryote | Membranaire, | 1) Anticorps | [12] |
| Mammifère, | épitope 1D4 | 2) IEX | ||
| singe vert africain (cellules COS-1) | ||||
| M1/ acétylcholine | Eucaryote | Membranaire, | Pas décrite | [13] |
| Mammifère, hamster | épitopes Flag et biotine | |||
| (cellules BHK-21) | ||||
| A1/ adénosine | Eucaryote | Membranaire, | Anticorps | [16] |
| Mammifère, souris (rétine) | épitope 1D4 | |||
| ETA, ETB/ endothéline | Acellulaire, in vitro | Micelles détergents ou précipité, | IMAC | [17] |
| Extraits bactériens ou extraits de réticulocytes | épitope T7, épitope 6×His |
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