Schéma récapitulatif de la procédure expérimentale de production de la lignée EndoC-βH1. Étape 1. Transduction d’ébauches fœtales humaines avec un vecteur lentiviral RIP-SV40LT exprimant l’antigène T de SV40 sous le contrôle du promoteur de l’insuline (RIP). Étape 2. Transplantation chez la souris SCID du tissu transduit. Après quelques mois on observe la formation d’un insulinome. L’analyse immunohistochimique d’une coupe de cet insulinome révèle un très grand nombre de cellules exprimant l’insuline (rouge) et coexprimant le marqueur de prolifération Ki67 (vert). Étape 3. Les insulinomes sont prélevés, dissociés et les cellules transduites avec un nouveau vecteur exprimant la telomerase reverse transcriptase humaine (hTERT) sous contrôle du promoteur de l’insuline. L’expression de ce transgène hTERT permet de prévenir la sénescence des cellules en prolifération active. Les cellules nouvellement transduites sont transplantées dans une souris SCID et conduisent à la formation d’un nouvel insulinome. Étape 4. Cet insulinome est prélevé, dissocié et les cellules amplifiées en culture, aboutissant à la production d’une lignée de cellules bêta pancréatiques. Les cellules de la lignée EndoC-βH1 sont positives pour l’expression de l’insuline (marquage rouge). Le noyau des cellules est visualisé en bleu.