Figure 4.

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Principe des puces à protéines de type « phage ». Ce type de puces repose sur l’immobilisation de protéines exprimées à partir d’une banque d’ADNc. Comme pour le SEREX, les ADNc sont synthétisés à partir des ARNm issus de tumeurs ou de cultures cellulaires. Une fois insérée dans le génome des bactériophages λ, cette banque d’expression est enrichie en phages réagissant spécifiquement contre des sérums de patients atteints de cancer par des cycles répétés de purification. Ces phages réactifs sont alors amplifiés et déposés sur des lames. Ces lames sont ensuite hybridées avec des sérums de patients atteints de cancer et marqués par la cyanine 5 (Cy5) et l’intensité de marquage est normalisée à l’aide d’un anticorps marqué par la cyanine 3 et dirigé contre une protéine de la capside du phage. Après avoir scanné la lame, il est possible d’isoler les phages positifs et d’en extraire l’ADN afin d’identifier l’antigène correspondant.
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