Figure 1.
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Caractéristique et fonctionnement de la cellule microfluidique. A. Organisation générale de la cellule microfluidique avec, à gauche, la partie pour manipuler les cellules, suivie de la section où se réalise l’électrophorèse capillaire et, à droite, la plate-forme de comptage des protéines. B. procédure de l’analyse : (1) Injection des cellules ; la valve 1 s’ouvre et se ferme (rectangle violet si la valve est fermée et blanc si ouverte) jusqu’à ce qu’une cellule s’approche de la valve à 3états (rectangle orange). (2) La valve à 3états s’ouvre alors pour permettre de capturer une cellule dans la chambre de réaction (délimitée par la valve à 3 états et la valve 2). (3) La valve à 3 états est alors mise en position semi-ouverte (dégradé orange), l’ouverture de la valve 2 et 5 permet d’injecter de l’air et d’éliminer l’excès de fluide. (4) La valve 6 est alors ouverte pour permettre l’introduction du tampon nécessaire à la lyse de la cellule dans la chambre de réaction. (5) La valve 6 est ensuite refermée; la fermeture de la valve à 3 états et l’ouverture de la valve 7 et 8 permet d’introduire le tampon utilisé pour la séparation électrophorétique. (6) Finalement, la valve à 3 états est réglée en position semi-ouverte, les valves 2 et 4 sont ouvertes et l’électrophorèse capillaire est alors déclenchée. C. Caractéristiques du coussin de détection permettant de compter des molécules uniques. D. Modification du microscope confocal par des lentilles cylindriques pour l’obtention d’un champ d’excitation par le laser plus large.
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