Figure 3.
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Modèles de différenciation lymphoïde humaine in vitro. Les cellules souches hématopoïétiques (CSH) humaines portant le marqueur de surface CD34+ et dont une partie exprime le récepteur Notch1, sont isolées à partir de sang de cordon ombilical ou de la moelle osseuse adulte. Les CSH sont alors cultivées pendant plusieurs semaines en présence de cytokines (IL-7 et ligand de Flt3 [Flt3-L]) et d’un support de cellules stromales qui miment soit le microenvironnement médullaire de la moelle osseuse (OP9), soit le microenvironnement thymique (OP9-hDelta1). A. Le stroma OP9 est une lignée dérivée de la moelle osseuse de souris M-CSF−/− (macrophage-colony-stimulating factor, M-CSF) et qui exprime de manière endogène les ligands Jagged1 et Jagged2. Ce stroma induit au bout de trois semaines une différenciation lymphoïde B des CSH et reproduit ainsi la différenciation observée dans la moelle osseuse. B. Le stroma OP9-hDelta1 est dérivé de la lignée OP9 décrite précédemment en y surexprimant le ligand Delta1 humain de manière ectopique. L’expression du ligand Delta1 induit une inhibition complète du développement B et conduit après environ 5 semaines à une différenciation lymphoïde T. Ce stroma permet de reproduire in vitro les étapes précoces de la différenciation thymique jusqu’au stade DP et lymphocytes T γδ. NB : Des résultats analogues sont obtenus à partir de CSH murines mises en culture avec la lignée OP9 ou OP9-mDelta1.
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