Figure 3.

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Analyse phénotypique résultant d’un gain ou d’une perte de fonction dans les îlots de cellules transfectées. La détection de cellules fluorescentes après transfection par des vecteurs d’expression codant pour l’EGFP (A) a permis la mise au point de logiciels d’analyse des puces à cellules. Ces outils, combinés à des marqueurs spécifiques, devraient permettre, à terme, d’identifier des gènes impliqués dans différentes fonctions cellulaires. À titre d’exemple, nous étudions au laboratoire les gènes impliqués dans la prolifération cellulaire de kératinocytes humains (HaCaT), par immunofluorescence avec un anticorps fluorescent anti-PCNA, en l’absence de calcium (cellules en prolifération) ou en présence de 2 mM de calcium (cellules différenciées) (B). De même, nous pouvons étudier, chez la souris, la différenciation de myoblastes en myotubes par immunofluorescence avec un anticorps anti-myosine qui marque spécifiquement les cellules différenciées (D). Mais d’autres phénotypes peuvent être étudiés, comme l’apoptose, qui est, dans ce dernier exemple, induite par la surexpression de la protéine DR5 dans des cellules humaines HeLa et détectée par l’activité des caspases (C).
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