Topologie et localisation subcellulaire de Nox4. A. Schéma montrant l’organisation topologique de la séquence protéique de Nox4. Nox4 s’organise en six domaines transmembranaires (TM) avec les extrémités amino- et carboxy-terminales du coté cytosolique. Les piliers transmembranaires sont connectés par des boucles appelées A, B, C, D et E. Les boucles B et E ont été décrites comme étant essentielles à la régulation de l’activité de Nox4 [15, 33]. La boucle B permettrait un rapprochement des sites NADPH/FAD vers l’hème A, facilitant le transfert d’électrons. L’intégrité de la boucle E (insert) est nécessaire au bon fonctionnement de Nox4 et, selon l’état d’oxydation des deux cystéines C226 et C270 (en rouge), à la génération directe de H₂O₂ ou de O₂^{• -} par Nox4 [14]. L’histidine H222 (en vert) pourrait servir de source de protons pour accélérer la dismutation spontanée de O₂^•- en H₂O₂. Les épitopes des anticorps monoclonaux (ACm) dirigés contre Nox4 (10B4, 8E9, 7C9, 5F9 et 6B11) sont représentés sur la séquence protéique de Nox4 [11]. B. Images de microscopie confocale montrant le marquage de Nox4 au niveau de la membrane plasmique réalisé avec l’anticorps monoclonal 8E9 dans les cellules HEK293 non perméabilisées surexprimant Nox4 (images du haut), et le marquage généralisé de Nox4 réalisé avec les anticorps monoclonaux 5F9 et 6B11 dans ces mêmes cellules perméabilisées (images du bas) [11].