Figure 4.

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Images obtenues en microscopie à feuille de lumière. A. Follicule de drosophile melanogaster marqué actine-GFP (préparé par A. Ephrussi et E. Reynaud, EMBL-Heidelberg, Allemagne) : vue 3D en projection d’intensité maximale du volume reconstruit à partir de 12 piles de 120 images (voxel = 0,3225 μm × 0,3225 μm × 1,29 μm). Encart : vue d’un pont cytoplasmique reliant 2 cellules nourricières. Vidéo 12. B. Embryon d’un poisson zèbre Danio rerio marqué GFP-Claudine B (à gauche) et mCherry-H2B (à droite) (préparé par U. Schulze et D. Gilmour, EMBL-Heidelberg, Allemagne) : vues 3D en projection d’intensité maximale du volume reconstruit à partir de 16 piles de 576 images prises à 22,5 unités d’intervalle (voxel = 0,74 μm × 0,74 μm × 1,48 μm). C. Embryon d’un poisson zèbre Danio rerio marqué H2B-eGFP à plusieurs stades du développement embryonnaire : t = 200, 650 et 1 200 min après fertilisation. Images adaptées de [18]. Animation complète sur http://www.embl.de/digitalembryo/fly.html. D. Drosophile melanogaster adulte obtenue par autofluorescence. Comparaison entre 3 vues obtenues en projection d’intensité maximale du volume reconstruit à partir d’une pile de 778 images prises à l’angle 0o (en haut), d’une pile de 778 images prises à l’angle 180o (au milieu) et de 32 piles de 778 images prises à 11,25o d’intervalle (en bas) (voxel = 0,74 μm × 0,74 μm × 2,96 μm). Dans les vues 0o et 180o, la drosophile est éclairée par la gauche mais en raison de son opacité, la partie de droite apparaît manquante. Ces parties manquantes sont révélées en illuminant l’échantillon suivant différentes directions. En additionnant toutes ces informations, il devient possible de reconstruire une vue 3D de l’échantillon avec une excellente résolution spatiale (en bas). Vidéo 22. Objectifs d’illumination : A. Zeiss Epiplan 10x/0,2 ; B-D. Zeiss Plan-Apochromat 5x/0,16. Objectifs de détection : A. Zeiss Achroplan W 20x/0,5 ; B-C. Zeiss C-Apochromat W 10x/0,45 ; D. Zeiss Fluar 5x/0,25. Barres d’échelle : A. 20 μm, B. 50 μm, C. 100 μm, D. 400 μm.
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