Différence d’illumination en microscopies confocale, biphotonique et à feuille de lumière. En microscopie confocale (CLSM), l’illumination (en bleu) par un diaphragme oblige à effectuer un balayage de la surface de la tranche optique d’intérêt pour reconstruire une image de l’objet étudié (en haut, à gauche). Puisque l’illumination et la détection (en vert) se font par le même objectif, tout l’échantillon est pratiquement illuminé (zone noire en bas), bien qu’un seul plan de l’échantillon soit réellement imagé. En microscopie biphotonique à balayage laser (2PLSM), le volume d’excitation (en bleu clair) est réduit à la région autour du plan d’intérêt, mais les puissances d’excitation souvent élevées peuvent compromettre la viabilité des échantillons. En microscopie à feuille de lumière, l’illumination latérale permet d’exciter uniquement le plan de détection et aucun photo-dommage n’est alors infligé en dehors de ce plan. Une vue de l’échantillon est réalisée en déplaçant l’échantillon latéralement à travers la feuille de lumière et en enregistrant à chaque étape une image. En imagerie multivues (à droite), le même volume est enregistré suivant plusieurs directions. Les informations provenant des différentes vues sont ensuite combinées pour former une seule pile d’images.