Microscopie de super-résolution par photoactivation. A.Limite de la diffraction en microscopie. Des sources de lumière ponctuelle apparaissent comme des taches étendues de largeur d (courbe grise). Tant que leur séparation reste supérieure (à gauche) ou égale (au centre) à d, ces points peuvent être résolus individuellement. En revanche, lorsqu’ils sont situés à une distance plus faible (à droite), leurs signaux se superposent (en rouge) et on ne peut plus les distinguer. B. Principe de la microscopie haute résolution avec des molécules photoconvertibles. Lorsqu’elles émettent dans le vert, elles ne sont pas distinguables. Si on en active un petit nombre, on peut mesurer les spots de fluorescence de molécules individuelles (en rouge). En déterminant le centre de ces spots, la distribution spatiale des molécules est reconstruite point à point. C. Exemple d’image haute résolution obtenue à partir d’un marquage du cytosquelette d’actine dans des cellules nerveuses en culture. L’image conventionnelle est présentée en vert. Après photoactivation, on obtient quelques spots dans le champ de vue (au centre) que l’on peut localiser avec une précision d’environ 25 nm. En répétant ce processus, une image haute résolution est obtenue (à droite).