Compartimentation in vitro : format permettant la sélection directe de microgouttelettes en fonction d’un signal de fluorescence. Un milieu de transcription/traduction in vitro contenant une banque de gènes codant pour des enzymes mutées est émulsionnée pour former une émulsion d’eau-dans-l’huile avec au maximum un gène par compartiment (1). Les gènes sont transcrits et traduits à l’intérieur des microgouttelettes (2). Les protéines possédant l’activité enzymatique recherchée convertissent un substrat non fluorescent en un produit fluorescent. L’émulsion d’eau dans l’huile est ensuite convertie en une émulsion d’eau-dans-l’huile-dans-l’eau (3). Les gouttelettes fluorescentes sont séparées des gouttelettes non fluorescentes (ou de microgouttelettes contenant des fluorophores différents) à l’aide d’un trieur de cellules à fluorescence (FACS, fluoresence activated cell sorter) (4). Les gènes provenant des microgouttelettes fluorescentes, qui codent pour des enzymes actives, sont purifiés et réamplifiés par PCR (5). Ces gènes sont ensuite à nouveau soumis à compartimentation pour d’autres cycles de sélection (6). Reproduit avec la permission de [43].