L’approche double-hybride. A. La protéine GAL4 de levure est constituée d’un domaine de liaison de l’ADN (orange) et d’un domaine d’activation de la transcription (jaune). B. Dans l’approche double-hybride, une construction de sélection contenant un gène rapporteur sous le contrôle de la séquence de liaison de GAL4 est introduite, ainsi qu’une fusion entre le domaine de liaison de GAL4 et la protéine d’intérêt (l’« appât », en rose).C. Ces levures modifiées sont ensuite transfectées par une banque d’ADNc préparée à partir du tissu d’intérêt, dans laquelle les ADNc sont fusionnés avec la séquence codant pour le domaine de transactivation.D. Si une protéine codée par cette banque d’ADNc complémentaire (la « proie », en rouge) interagit avec la protéine « appât », une reconstitution fonctionnelle a lieu et permet l’expression du gène rapporteur (transcription).