Augmentation de l’activité métalloprotéase nette, visualisée par zymographie in situ après convulsions épileptiques et ischémie cérébrale. La technique de zymographie in situ consiste à appliquer sur des coupes fraîches de tissu cérébral de la gélatine (substrat des gélatinases endogènes) couplée à la fluorescéine piégée. Lorsque les MMP des cellules clivent ce substrat, la fluorescéine est libérée et visualisée au microscope. L’intensité du signal fluorescent augmente avec l’activité protéolytique nette, résultante de l’équilibre entre protéases et inhibiteurs endogènes. A. Activité gélatinolytique constitutive dans l’hippocampe de rat témoin. B. Une hyperactivité neuronale (crises épileptiques) provoque une augmentation de l’activité gélatinolytique nette dans l’hippocampe de rat, 6 heures après l’injection d’un agent convulsivant, le kaïnate. C. L’activité gélatinolytique est inhibée par un inhibiteur de métalloprotéases, la phénanthroline. D. Activité gélatinolytique constitutive dans l’aire CA1 de l’hippocampe d’un rat témoin non ischémié (chirurgie identique aux rats ischémiés). E. Trois jours après une ischémie globale transitoire, on observe une augmentation importante de l’activité gélatinolytique associée, d’une part, aux neurones pyramidaux (p) en cours de dégénérescence et, d’autre part, aux cellules gliales réactives facilement repérées à l’extérieur de la couche de neurones pyramidaux, dans le strata oriens (so) et radiatum (sr). On notera également une activité gélatinolytique importante dans les vaisseaux sanguins (flèches rouges), probablement en relation avec une fragilisation de la barrière hématoencéphalique. Échelle : A-C, 100 µm ; D, E, 200 µm (D et E, d’après [9]).