Figure 3

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Décours temporel de la prolifération cellulaire dans les noyaux vestibulaires désafférentés après neurectomie vestibulaire unilatérale chez le chat adulte A. Microphotographies illustrant le marquage BrdU immunopositif (BrdU+) dans les noyaux vestibulaires (NV) de chats contrôles et dans les NV désafférentés de chats examinés 1, 3, 7 et 30 jours après une neurectomie vestibulaire unilatérale (NVU). Chez les animaux contrôles aucune cellule BrdU+ n’est présente dans les NV. Échelle : 100 μm. B. Quantification du nombre de cellules néoformées marquées au BrdU dans le complexe des noyaux vestibulaires (NV) du côté de la NVU. Par rapport à des animaux contrôles chez qui aucune cellule en division mitotique n’est observée dans les NV, un pic de prolifération cellulaire apparaît 3 jours après la NVU dans les 4 principaux NV : le latéral (NVL), l’inférieur (NVI), le médian (NVM) et le supérieur (NVS). La prolifération cellulaire est quasiment absente dès la fin de la 1re semaine post-lésionnelle. C. Différenciation cellulaire dans les noyaux vestibulaires désafférentés après neurectomie vestibulaire unilatérale chez le chat adulte. L’utilisation de marqueurs spécifiques des cellules microgliales (Ox42, anticorps monoclonal anti-CD11b/c), des astrocytes (GFAP, glial fibrillary acidic protein) et des neurones (NeuN) permet de déterminer la nature des cellules en prolifération (BrdU). L’analyse en microscopie confocale montre que des nouvelles cellules ont incorporé du BrdU 3 jours après NVU, ont survécu et se sont différenciées en neurones, en astrocytes et en microglie 30 jours après la lésion. Les noyaux BrdU+ sont en rouge et les autres marqueurs de différenciation en vert : NeuN+ (B, C) ; GFAP+ (E, F) ; Ox42+ ; (H, I) ; GAD67+ (K, L). Un nouveau neurone GABAergique appartenant au noyau vestibulaire médian désafférenté est illustré (J, K, L). Le marquage nucléaire au BrdU (J) indique qu’il s’agit d’une nouvelle cellule qui a survécu à ce délai post-lésionnel ; le marquage GAD67 (K) montre qu’elle exprime l’enzyme de synthèse du GABA. La colocalisation par cette cellule des 2 marqueurs (L) démontre qu’il s’agit d’un neurone GABAergique de moyenne taille (barre de calibration : 20 μm). D. Histogrammes représentant le nombre de cellules BrdU+, NeuN+, GFAP+ et Ox42+ dans les NV 30 jours après NVU. Les pourcentages indiqués sont calculés dans la population BrdU+. L’analyse des colocalisations en microscopie confocale montre qu’un fort pourcentage de cellules se différencient en neurones (environ 40 %) ou en astrocytes (pourcentage similaire) dans les noyaux vestibulaires latéral (NVL), inférieur (NVI) et médian (NVM), tandis que le taux de neurones est très faible dans le noyau supérieur (NVS) qui, en revanche, a un fort taux d’astrocytes. On remarquera que la proportion de cellules microgliales est faible et comparable (environ 15 %) dans tous les noyaux vestibulaires.
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