Stratégie d’édition génique de lymphocytes B par la technique CRISPR-Cas9 pour produire des anticorps neutralisant le virus VIH-1. A. À partir des cellules mononucléées du sang d’individus infectés par le VIH (VIH1⁺) et ayant développé des anticorps neutralisants à large spectre (bNAb), les lymphocytes B spécifiques des antigènes viraux sont isolés par des techniques de capture ou de criblage de cellules uniques [2]. Les gènes codant les domaines variables VH et VL des chaînes lourdes (IgH) et légères (IgL) de ces lymphocytes B anti-VIH-1 sont alors amplifiés par RT-PCR, séquencés, analysés, et clonés dans des vecteurs d’expression. Les anticorps monoclonaux recombinants sont produits par transfection de cellules eucaryotes, purifiés, et caractérisés de manière très détaillée, en particulier pour leur capacité à neutraliser les différents mutants de VIH-1 et à détruire des cellules infectées in vitro et in vivo dans des modèles animaux [2]. B. Les gènes codant IgH et IgL sont alors utilisés pour construire des cassettes d’expression bNAb [12]. Grâce au système CRISPR-Cas9, ces transgènes bNAb peuvent être ensuite insérés spécifiquement dans les locus Ig de lymphocytes B humains stimulés in vitro, qui vont désormais exprimer ces bNAb d’intérêt [12]. Réimplantés in vivo, les lymphocytes B transgéniques peuvent se différencier en plasmocytes qui sécrétent alors les bNAb. C. Théoriquement, le transfert de ces cellules productrices de bNAb chez les sujets à risque d’infection par le VIH-1 permettrait de les protéger contre l’infection. Les lymphocytes B (LyB) mémoires à bNAb anti-VIH-1 présents in vivo auraient aussi l’avantage de participer aux réponses immunes contre les virus résistant au bNAb originel qui émergent chez les sujets infectés, en continuant à évoluer par maturation d’affinité et sélection de variants bNAb actifs contre ces nouveaux virus.