Insertion d’une lésion dans le génome bactérien. Un vecteur plasmidique contenant une lésion unique dans le gène rapporteur lacZ codant la β-galactosidase est introduit par électroporation dans une souche E. coli réceptrice. Cette souche exprime l’intégrase du phage lambda qui permet l’intégration du vecteur à un site spécifique. Lorsque la bactérie réplique son chromosome, l’utilisation de la synthèse translésionnelle (TLS, trans lesion synthesis) se traduit par l’apparition d’un secteur bleu, tandis que l’utilisation du mécanisme de contournement des dommages (ou DA pour damage avoidance) apparaît comme une colonie blanche sur milieu indicateur X-gal (ou 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-bêta-D-galactopyranoside). Les séquences Att sont des séquences d’attachement, B pour la bactérie, P pour le phage et R et L pour le prophage. Amp : gène codant la résistance à l’ampicilline ; LacZ : gène codant la β-galactosidase ; OriC : origine de réplication chez E. coli.