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Figure 2.

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Cytométrie conventionnelle. A. Schéma des spectres d’excitation (lignes) et des spectres d’émission (aires) de plusieurs fluorochromes entre 300 et 800 nm en fonction des lasers bleu (488 nm), vert/jaune (561 nm) et violet (405 nm). B.  Comparaison des spectres d’émission de 4 fluorochromes. Les rectangles représentent la fenêtre de longueurs d’ondes des différents filtres bande-passe utilisés classiquement sur les cytomètres pour collecter les photons émis par chaque sonde sur son détecteur spécifique. Les traits en pointillés verticaux représentent les possibilités des contaminations croisées des différents fluorochromes sur chacun des autres détecteurs. C.  Schéma simplifié d’un cytomètre. Le schéma montre un cytomètre possédant 3 lasers (violet, bleu et vert/jaune) décalés dans l’espace dont les faisceaux rencontrent un flux de cellules marquées par des fluorochromes différents. Plusieurs jeux de miroirs et de filtres dichroïques permettent d’adresser les fluorescences émises sur les détecteurs dédiés. Les graphiques montrent le cas d’une étude de cycle et d’apoptose sur des cellules non fixées en l’absence (panneau de gauche) ou en présence (panneau de droite) d’un inducteur de mort cellulaire (V : cellules vivantes ; M : cellules mortes ou en apoptose).

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