Construction, in vivo et in vitro, d’un axe embryonnaire complet à partir de deux gradients de morphogènes, BMP et Nodal, instruisant les cellules naïves du pôle animal d’un embryon de poisson zèbre. A. La création expérimentale de deux gradients opposés de BMP et de Nodal (par injection de leurs ARN respectifs dans des blastomères séparés) récapitule au pôle animal de l’embryon la variation graduelle du rapport entre les activités des voies de signalisation BMP et Nodal observée dans la région marginale d’un embryon sauvage. Ceci conduit (B) à l’organisation d’un axe secondaire complet à partir des cellules du pôle animal [7]. C. Explantation au stade 512 cellules du territoire animal d’un embryon de poisson zèbre (double flèche rouge). D. Placé en milieu de culture, l’explant devient sphérique au bout d’une heure et les cellules superficielles se différencient en cellules de la couche enveloppante (précurseur du périderme) [7]. Après 24 h, (E) la couche péridermique est rompue suite à la prolifération et la croissance des cellules embryonnaires. En absence de stimulation, aucun tissu ou organe n’est observé [7]. F. Explantation de la région du pôle animal après injection dans deux blastomères séparés d’un mélange d’ARNm BMP et de fluorescéine-dextran d’une part, et d’un mélange d’ARNm Nodal et de rhodamine-dextran d’autre part. G. Après 1 h en milieu de culture, l’explant est sphérique et la position des clones BMP (vert) et Nodal (rouge) est visualisée par les fluorescences de la fluorescéine et de la rhodamine [7]. H. À 5 h de développment, l’explant instruit par les gradients morphogéniques BMP et Nodal forme un blastopore et gastrule [7]. I. L’organisation de cette gastrula est très similaire à celle d’une gastrula d’embryon d’amphibien avec une cavité blastocœlienne en position animale et une asymétrie du blastopore, avec une lèvre blastoporale dorsale plus épaisse [7]. J. Après 24 h en milieu de culture, les explants instruits forment des embryoïdes très similaires aux embryons sauvages et dans lesquels on peut distinguer par exemple un cerveau antérieur, un tronc contenant un tube neural et une notochorde [7]. K. Vue dorsale de la partie céphalique d’un embryoïde construit par instruction d’explant du pôle animal. Cette partie céphalique est très similaire à celle d’un embryon sauvage et est caractérisée notamment par la présence de deux yeux (comprenant rétine et cristallin) séparés par du tissu céphalique antérieur.