Caractérisation moléculaire et fonctionnelle des mélanocytes dérivés de cellules souches pluripotentes. Notre protocole permet de différencier des cellules souches pluripotentes humaines (cellules hES et iPS) en mélanocytes après 40 à 60 jours de traitement par différents agents pharmacologiques et cytokines, incluant BMP4, mimant les signaux impliqués dans la formation de ce lignage au cours du développement embryonnaire humain. Une fois le processus de différenciation terminé, les cellules dont la morphologie est similaire à celle des mélanocytes adultes en culture sont isolées et caractérisées (A). Nos travaux démontrent que ces cellules expriment les marqueurs caractéristiques des mélanocytes, tels que TYRP1 et SLUG (B), qu’elles produisent de la mélanine au sein de mélanosomes matures (C et D) et que ces mélanosomes peuvent dans un second temps être transférés à des kératinocytes (cellules exprimant la protéine K14) avec lesquels elles sont cocultivées (E). Finalement nous avons mis en évidence la fonctionnalité de ces cellules par la génération d’épidermes reconstruits in vitro : ces mélanocytes dérivés de cellules souches pluripotentes pouvaient se localiser, comme c’est le cas physiologiquement, au niveau de la couche basale de l’épiderme (flèches) (F).