Processus de différenciation des cellules souches embryonnaires humaines en kératinocytes. Les CSEh sont différenciées en kératinocytes après 40 jours de traitement par différents agents pharmacologiques et par des cytokines mimant les signaux impliqués dans la formation de l’épiderme au cours du développement embryonnaire humain. On retrouve l’expression des marqueurs caractéristiques de chacune des étapes du développement (A) et une chute rapide des marqueurs de pluripotence (OCT4, NANOG et SSEA3), l’expression transitoire des marqueurs des progéniteurs épithéliaux (kératines 8 et 18), puis l’expression des marqueurs des kératinocytes basaux (kératines 5 et 14) et enfin ceux des couches supérieures de l’épiderme (la kératine 10 et l’involucrine). L’analyse par cytométrie de flux confirme qu’une fois le processus de différenciation enclenché, les CSEh perdent l’expression de SSEA3, expriment transitoirement la kératine 18 puis la kératine 14 (B). AA : acide ascorbique ; BMP4 : bone morphogenetic protein 4 ; FAD : milieu de culture fait d’un mélange de milieu Dulbecco et Ham F12.