Immunohistochimie et Western blots de p73 dans des tumeurs neuroblastiques. A. Immunohistochimie à l’aide d’un anticorps reconnaissant les deux isoformes (TAp73 et ΔNp73) de p73. a : médullo-surrénale normale ; à noter un marquage intense au niveau de la membrane nucléaire interne (grosse flèche rouge) associé à un marquage faible, mais significatif, du cytoplasme (petite flèche rouge) des cellules chromaffines. Les cellules corticosurrénales de la zone réticulaire ne sont pas marquées. b : neuroblastome indifférencié au stroma pauvre ; marquage homogène des noyaux des neuroblastes (grosse flèche rouge) et absence de marquage dans les cellules de Schwann (petite flèche rouge). c : ganglioneuroblastome de type nodulaire au diagnostic ; neuroblastes à différents états de maturation ganglionnaire, les plus différenciés marqués au niveau de la membrane interne nucléaire (grosse flèche rouge). d : ganglioneurome après maturation ganglionnaire sympathique, consécutive à une chimiothérapie (adriamycine/vincristine), du ganglioneuroblastome présenté en c ; grosses cellules ganglionnaires complètement différenciées avec noyau positif et cytoplasme abondant (grosse flèche rouge) émettant des neuropiles (prolongements cytoplasmiques, neuronaux et gliaux, répartis entre les cellules nerveuses) (petites flèches rouges). B. Isoformes protéiques de p73 de tumeurs neuroblastiques. Analyse par Western blot de lysats cellulaires totaux incubés en présence d’un anticorps polyclonal anti-p73 (Sanofi Recherches, Toulouse, France). Les tumeurs sont présentées selon leur type histologique : de gauche à droite, NB (neuroblastome), GNB/NB (tumeur en voie de différenciation), GNB/GN (tumeur ganglionnaire mature). Deux premières colonnes de gauche, isoformes de référence (TAp73 et ΔNp73) issues de la lignée SK-N-AS transfectée par les plasmides recombinants correspondants. Canal 8 : présence d’une espèce de haut poids moléculaire (130-150 kda) (flèche) et absence de l’isoforme ΔNp73 pour une tumeur neuroblastique mature. L’espèce protéique de poids moléculaire d’environ 50 kDa correspond vraisemblablement à un produit de dégradation de p73. (Reproduit d’après [32] avec la permission de Am J Pathol.)